Przeciwciała to niewielkie cząsteczki białkowe, które pełnią istotną rolę: wiążą się z przedmiotami z bardzo wysoką specyficznością.

Wysoka specyficzność wiązania pozwala tym białkom działać jak cząsteczki, które mogą dotrzeć do wszystkiego, co chcesz namierzyć.

Na przestrzeni lat naukowcy wykorzystali tę specyficzną zdolność przeciwciał do wykorzystywania ich zarówno w badaniach, jak i terapii.

Przeciwciała te mogą mieć różne specyficzności i organizmy gospodarzy. Mogą być monoklonalne lub poliklonalne i mogą być ukierunkowane na niezliczoną ilość cząsteczek.

Planujesz wykorzystać przeciwciała w swoich badaniach, ale nie możesz znaleźć żadnych przeciwciał dla docelowej cząsteczki?

Nie martw się, mamy dla Ciebie pomoc.

W tym artykule opowiemy Ci wszystko o różnych zastosowaniach przeciwciał i o tym, jak możesz uzyskać niestandardowe królicze przeciwciała monoklonalne do swoich badań!

Zastosowania przeciwciał w medycynie

Diagnostyka

Przeciwciała stały się kluczowymi cząsteczkami w diagnostyce medycznej. Można ich używać na dwa sposoby:

• Wiele różnych zestawów biochemicznych i testów działa poprzez wykrywanie przeciwciał specyficznych dla danej choroby/organizmu w celu określenia, czy choroba jest obecna, czy nie.

• Odwrotnie, techniki immunodiagnostyczne, takie jak ELISA, wykorzystują wiele przeciwciał do wykrywania określonych antygenów, które są oznaką obecności choroby.

Co więcej, pomiar poziomów różnych klas przeciwciał może również zapewnić ważny wgląd w stan układu odpornościowego. Na przykład podwyższony poziom IgM może być oznaką wirusowego zapalenia wątroby.

Na poziomie klinicznym ten wgląd pomaga informować lekarzy o rokowaniach i krokach leczenia, które mogą podjąć.

Podobnie, przeciwciała mogą być również wykorzystywane do opracowywania dostępnych bez recepty zestawów diagnostycznych. Na przykład szybkie zestawy stosowane do wykrywania COVID-19 lub zestawy testów ciążowych, które wiążą się z ludzkim hormonem gonadotropiny kosmówkowej, wykorzystują przeciwciała.

Terapia

Gotowe przeciwciała, takie jak te produkowane przez firmy zajmujące się opracowywaniem przeciwciał monoklonalnych, mogą być stosowane w celu zapewnienia pacjentom odporności biernej.

Obecnie przeciwciała monoklonalne są szeroko stosowane w leczeniu wielu chorób, w tym stwardnienia rozsianego, łuszczycy, a nawet reumatoidalnego zapalenia stawów. Kilka różnych form nowotworów jest również leczonych przy użyciu przeciwciał monoklonalnych.

Ponad tuzin przeciwciał zostało zatwierdzonych przez FDA do leczenia raka. Wiele badań klinicznych testuje jeszcze więcej przeciwciał, które mogą działać jako środki terapeutyczne w leczeniu raka.

Terapia prenatalna

Przeciwciała Rho(D) są stosowane w leczeniu prenatalnym i minimalizują ryzyko wystąpienia choroby hemolitycznej u dziecka.

Jeśli matka i płód są niezgodni pod względem Rh, zmieszanie ich krwi może spowodować uczulenie krwi Rh- matki na antygen Rh+ płodu. Może to spowodować, że układ odpornościowy matki rozpocznie atak przeciwko płodowi.

Jeśli jednak podamy matce przeciwciała anty-RhD, antygen Rh płodu zostanie wyeliminowany. Zapobiegnie to wytwarzaniu przeciwciał przez limfocyty matki i pomoże matce bezpiecznie zajść w ciążę nawet w przyszłości.

Badania biomedyczne

Postępy w dziedzinie fermentacji i inżynierii komórkowej umożliwiły firmom drastyczne zwiększenie skali produkcji przeciwciał. Pozwoliło to na szerokie zastosowanie przeciwciał w celu zwiększenia wydajności i wyników badań.

Przyjrzyjmy się, w jaki sposób można wykorzystać przeciwciała do badań.

Testy immunosorbcyjne

Test immunoenzymatyczny (ELISA) jest bardzo popularną techniką stosowaną do wykrywania i pomiaru ilości antygenu w próbkach.

Bezpośrednie testy ELISA mają sprzężone przeciwciała wykrywające, które wiążą się z docelowym antygenem, który jest bezpośrednio unieruchomiony na płytce. Ten typ testu ELISA wykorzystuje tylko jeden rodzaj przeciwciał.

Z drugiej strony, pośredni test ELISA wykorzystuje dwa rodzaje przeciwciał: przeciwciało pierwotne i przeciwciało wtórne. Przeciwciało pierwotne wiąże się z antygenem, a przeciwciało wtórne wiąże się z przeciwciałem pierwotnym.

Western blotting

W przypadku Western blot, najpierw musimy rozdzielić białka elektroforetycznie, a następnie przenieść pasma na bibułę - zwykle membranę nitrocelulozową.

Następnie dodajemy znakowane przeciwciała. Jeśli nasza cząsteczka docelowa (ta, z którą wiążą się przeciwciała) jest obecna wśród pasm, przeciwciała będą się z nią wiązać, a następnie możemy wizualizować związane przeciwciała, aby określić zarówno obecność, jak i rozmiar cząsteczki.

Immunohistochemia/immunocytochemia

Immunohistochemia i immunocytochemia to techniki stosowane do określania in situ obecności i wewnątrzkomórkowej lokalizacji białek.

Podobnie jak pośredni test ELISA, techniki te również wykorzystują dwa różne przeciwciała. W tym przypadku przeciwciało pierwotne wiąże się z białkami docelowymi, a przeciwciała wtórne wiążą się z kompleksem antygen-przeciwciało pierwotne.

Testy immunoprecypitacji

W technikach immunoprecypitacji przeciwciała mogą być używane do wiązania białka docelowego i wytrącania go w celu łatwiejszego i dokładniejszego oczyszczania.

Po pierwsze, przeciwciała są przyłączane do kulek agarozowych, a kulki są następnie inkubowane z mieszaniną zawierającą interesujący nas cel. Przeciwciała wiążą docelowe antygeny, a ponieważ są one połączone z kulkami, możemy je oddzielić za pomocą wirowania.

Zastosowania in vivo

Przeciwciała możemy również wykorzystywać do niektórych analiz funkcjonalnych in vivo. Na przykład, przeciwciała mogą być wykorzystywane do namierzania i blokowania receptorów na powierzchni komórki, aby sprawdzić, jaką rolę odgrywają one w komórce.

Cytometria przepływowa

Przeciwciała są rutynowo stosowane w cytometrii przepływowej. Korzystając z tej techniki, możemy dołączyć przeciwciała do powierzchni poszczególnych komórek i oddzielić te komórki od mieszaniny. Wszystkie te przeciwciała są znakowane fluorochromami, które umożliwiają ich łatwe wykrycie.

Zaawansowane systemy cytometrii przepływowej są również wyposażone w możliwość obsługi komórek znakowanych nawet 3 różnymi przeciwciałami.

Jak uzyskać własne królicze przeciwciała monoklonalne?

W ostatnich latach produkcja przeciwciał króliczych nabrała tempa. Królicze przeciwciała mon oklonalne zastąpiły mysie przeciwciała monoklonalne ze względu na ich liczne zalety, w tym większy zakres cząsteczek docelowych, wyższą specyficzność i większe powinowactwo.

Jeśli jednak chcesz wyprodukować niestandardowe królicze przeciwciała monoklonalne, musisz upewnić się, że współpracujesz z zaufanym dostawcą, ponieważ produkcja króliczych przeciwciał monoklonalnych może być kosztowna.

Potrzebujesz firmy, która ma doświadczenie w produkcji wysokiej jakości króliczych przeciwciał monoklonalnych, takiej jak Boster Bio. Produkuje ona jedne z najlepszych 0,001%, w pełni zwalidowanych, dojrzałych powinowactwem przeciwciał monoklonalnych.

Najlepsze jest to, że Boster może dostarczyć przeciwciała w mniej niż 6 miesięcy!

Na co więc czekasz? Rozpocznij projekt króliczych przeciwciał monoklonalnych dzięki niestandardowej usłudze produkcji króliczych przeciwciał monoklonalnych firmy Boster!

Referencje

Singh, S., Tank, N. K., Dwiwedi, P., Charan, J., Kaur, R., Sidhu, P., & Chugh, V. K. (2018). Przeciwciała monoklonalne: przegląd. Current clinical pharmacology, 13(2), 85-99.

Zahavi, D., & Weiner, L. (2020). Przeciwciała monoklonalne w terapii nowotworów. Antibodies, 9(3), 34.